硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组VacA卵黄抗体的保护作用
目的 观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础.方法 诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacA IgY,并进行纯化.在不同pH值的IgY液中加入不同浓度的硫糖铝和不同浓度的胃蛋白酶,将含不同浓度硫糖铝的IgY反复冻融7次,将含30%糖铝的IgY室温放置1 d~4周,ELISA法测定各实验组IgY的相对抗体活性(AT/Ac).结果 在pH 1.5、2.0和3.0的条件下,含30%~60%硫糖铝的IgY的相对抗体活性高于不加硫糖铝的IgY;在pH 1.5条件下,60%硫糖铝可使IgY的相对抗体活性保持68.7%;在pH 2.0和3.0条件下,50%和40%以上的硫糖铝几乎可完全保持IgY的相对抗体活性.在pH值为2.0和3.0时,正常胃蛋白酶浓度(0.02 mg/ml)下,30%以上的硫糖铝均可有效保护IgY的相对抗体活性.30%以上的硫糖铝可增强IgY的抗冻融能力.室温放置4周后,含30%硫糖铝的IgY仍能保持80%以上的相对抗体活性.结论 30%以上的硫糖铝可增强VacA IgY对低pH和胃蛋白酶的耐受能力及抗冻融能力,是较理想的IgY保护剂.
幽门螺杆菌、细胞空泡毒素抗原、卵黄抗体、硫糖铝、抗体活性
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R378;R945(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
重庆市教委资助项目渝教科2003-7-3;重庆市科委资助项目CSTC;2005EA5020
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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