多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白的原核表达及其生物活性
目的 原核表达多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性.方法 应用PCR法扩增Arg9-VP3序列,与载体pET-43.1a连接后.转化E. Coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+-NTA纯化后,进行肠激酶裂解、超滤浓缩,并检测其生物活性.结果 重组表达质粒pET-43.1a-Arg9-VP3经酶切鉴定和序列分析,证明构建正确.转化E. Coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达.纯化的融合蛋白纯度达90%以上,可抑制HeLa细胞增殖.结论 已成功地在大肠杆菌中表达了多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白,纯化的融合蛋白具有诱导HeLa细胞凋亡的能力.
多聚精氨酸、蛋白转导域、凋亡素、融合蛋白、原核表达、生物活性
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Q78;Q786;Q789(基因工程(遗传工程))
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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