人内皮抑素基因的定点突变及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的 对人内皮抑素(hES)基因进行定点突变,提高其在大肠杆菌中的可溶性表达量.方法 根据Internet网站提供的关于hES的结构信息及其结构与功能方面的研究文献,设计突变位点;利用生物信息学的相关网站,对hES突变体进行结构预测,验证突变位点设计的合理性;采用重叠延伸PCR方法进行hES基因的定点突变,并将突变基因和未突变基因分别亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,在大肠杆菌中进行融合表达,比较突变前后目的 蛋白的可溶性表达量.结果 三级结构预测结果表明突变位点设计合理,序列分析结果表明实现了hES基因的定点突变.突变基因的表达产物中,可溶性部分约占总表达量的40%,而未突变基因的表达产物几乎全部为包涵体.结论 已成功对hES基因进行了定点突变,突变后的hES可溶性表达量得到了提高.

关键词：人内皮抑素、定点突变、可溶性表达、重叠延伸PCR

所属期刊栏目：22

分类号：Q781;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：福建省自然科学基金C0740012;集美大学中青年创新团队专项基金2006A002

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：438-442