人表皮生长因子受体HER2胞外近膜区基因的克隆及原核表达
目的 克隆人表皮生长因子受体HER2胞外近膜区基因,原核表达并纯化重组蛋白.方法 从人乳腺癌细胞系SK-Br3中扩增HER2胞外近膜区编码基因,克隆并测序后,插入原核表达质粒pET41d中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并进行纯化.结果 从SK-Br3细胞系中扩增出387 bp的人HER2胞外近膜区基因;重组表达质粒pET41d/HER2构建正确;IPTG浓度为0.5 mmol/L时,目的蛋白的表达量最高;纯化后重组蛋白浓度为1.5 mg/ml.结论 已成功表达了HER2胞外近膜区蛋白,为抗HER2单克隆抗体的制备提供了抗原.
人表皮生长因子受体、胞外区、HER2、克隆、表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
2009-05-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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