PTD-SARA融合蛋白的表达、纯化及鉴定
目的 在大肠杆菌中表达PTD-SARA融合蛋白,并对其进行纯化和鉴定.方法 使用大肠杆菌偏爱密码子合成PTD-SARA全长基因,将其克隆人载体pQE-30中,构建重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA,转化感受态大肠杆菌M15,IPTG诱导表达.表达产物经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定及N-端测序.结果 重组表达质粒pQE-30-PTD-SARA经双酶切及测序鉴定证明构建正确.1.0 mmol/L IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的25%,主要以包涵体形式存在.纯化的融合蛋白纯度为94%,浓度为0.2 mg/ml,且具有良好的反应原性,N-端有14个氨基酸.结论 已成功表达并纯化了PTD-SARA融合蛋白,为其功能的研究奠定了基础,也为临床防治肾脏纤维化提供了一个新的策略.
PTD-SARA融合蛋白、表达、纯化、慢性肾病、纤维化
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Q786(基因工程（遗传工程）)
2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
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