人脑钠肽与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其活性

摘要：

目的 在毕赤酵母中表达重组人脑钠肽(BNP)与人血清白蛋白(HSA)融合蛋白,并检测其活性.方法 重叠PCR法拼接BNP二联体与HSA基因,插入表达载体pPIC9K,电穿孔法转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定及活性检测.结果 融合基因(BNP)2-HSA经测序正确,重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确.诱导72 h,融合蛋白表达量最高,可达200 mg/ml,且具有良好的反应原性,其活性为rhBNP标准品的1%.结论 已在毕赤酵母中成功表达了具有一定生物活性的(BNP)2-HSA融合蛋白,为开发BNP长效药物奠定了基础.

关键词：人脑钠肽、人血清白蛋白、融合蛋白、毕赤酵母、生物活性

所属期刊栏目：22

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z153;上海市科委生物医药重大科技攻关项目06DZ19020

在线出版日期：2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：226-229