猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5、M蛋白基因核酸疫苗表达质粒的构建及其免疫原性

摘要：

目的 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株GP5、M蛋白基因核酸疫苗表达质粒,并检测其免疫原性.方法 用RT-PCR法扩增PRRSV的GP5和M蛋白基因片段,克隆至真核表达载体pIRES-neo中,构建真核表达质粒pIRES-G和pIRES-M,制备核酸疫苗,以其单独或联合免疫小鼠,检测其免疫原性.结果 真核表达质粒pIRES-G和pIRES-M经酶切鉴定证明构建正确.第1次免疫后4周,各重组质粒免疫组小鼠血清ELISA抗体水平均显著升高,其中pIRES-G+pIRES-M组抗体水平最高;第1次免疫后9周,pIRES-G+pIRES-M组小鼠血清中和抗体效价(1:16)高于pIRES-G组(1:8)和pIRES-M组(1:4),但均低于灭活疫苗组(1:64);第1次免疫后9周,与pIRES-neo组相比,各组免疫小鼠脾细胞经特异性(PRRSV)和非特异件(ConA)抗原刺激后,均有明显的增殖,对非特异性刺激反应比特异性刺激反应略强.结论 已成功构建PRRSV GP5、M蛋白基因核酸疫苗表达质粒,二者联合免疫效果更好.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、GP5基因、M基因、核酸疫苗、免疫原性

所属期刊栏目：22

分类号：S858.28;Q781(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA213141

在线出版日期：2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：217-220,225