东亚钳蝎氯离子通道毒素BmK CTa在大肠杆菌中的异源表达及其对宿主菌增殖的影响

摘要：

目的 在大肠杆菌中异源表达东亚钳蝎氯离子通道毒素BmK Cta,并观察其对宿主菌增殖的影响.方法 构建BmK CT基因原核表达质粒pExSecI-rBmK Cta,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Westernblot进行鉴定.光密度法检测含不同质粒的大肠杆菌BL21(DE3)及空菌在37℃,LB液体培养基中的生长速率.结果 重组原核表达质粒pExSecI-rBmK Cta经PCR、双酶切和测序证明构建正确.目的蛋白的表达量占全菌总蛋白的19.94%,为可溶性表达,且具有良好的反应原性.rBmK Cta的异源表达显著抑制了大肠杆菌在对数生长期的增殖.结论 rBmK Cta在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达,且对大肠杆菌的生长具有显著的抑制作用.提示BmK CT可能特异性地作用于宿主菌的氯离子通道,对原核生物的氯离子通道有抑制作用.

关键词：东亚钳蝎、氯离子通道毒素、BmK CT、宿主菌、细胞增殖

所属期刊栏目：22

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30700534;山西省青年科技研究基金2008021039

在线出版日期：2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：209-212