Survivin启动子调控sea基因真核表达质粒的构建及其在肺癌细胞中的特异性表达

摘要：

目的 构建Survivin启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因真核表达质粒,并检测其在人肺腺癌A549细胞中的特异性表达.方法 以金黄葡萄球菌(ATCC25923)基因组为模板,PCR扩增sea基因.用sea基因替代以Survivin启动子为调控序列的pGL-S-RED质粒中的Red基因,构建真核表达质粒pGL-S-SEA.酶切及测序鉴定后,用脂质体转染A549细胞和MRC-5人胚肺成纤维细胞.RT-PCR检测两种细胞sea基因的转录情况.结果 Survivin启动子调控的、以超抗原SEA编码序列CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-S-SEA构建正确,并在A549细胞中启动了sea基因的转录,其强度为内参基因(GAPDH)的65.96%,而在MRC-5细胞对照中未检测到sea基因的转录.结论 已成功构建Survivin启动子调控的sea基因真核表达质粒,survivin启动子可在转录水平特异性地调控sea基因在A549细胞内表达,为下一步以其作为基因疫苗治疗肺癌奠定了基础.

关键词：Survivin启动子、超抗原、葡萄球菌肠毒素A、肺癌、基因疗法

所属期刊栏目：22

分类号：Q782;Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：147-149,157