人幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因穿梭质粒的构建及表达
目的 构建人幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒.并在耻垢分枝杆菌中进行表达.方法 PCR扩增幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI编码基因全长片段,克隆人pET32a(+)质粒.鉴定正确后,冉亚克隆人大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pJHSP70,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70-UreI,转化耻垢分枝杆菌,诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot检测,结果从幽门螺杆菌基因组中扩增出585 bp的UreI基因片段.重组质粒pJHSP70-UreI经酶切和PCR鉴定.与预期结果一致.目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的18.5%,且具有良好的反应原性.结论 已成功构建了幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒,并在耻垢分枝杆菌中获得表达.
大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒、幽门螺杆菌、尿素通道蛋白、耻垢分枝杆菌
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Q782;Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30371318;重庆市卫生局重点项目渝卫教[2007]1号文07-1-007
2009-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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