结核分枝杆菌ESAT-6重组二聚体的表达、纯化及其在血清学诊断中的初步应用

摘要：

目的 表达和纯化结核分枝杆菌早期分泌蛋白ESAT-6重组二聚体(rdESAT-6),并探讨其在结核病血清学诊断中的价值.方法 以HG856A核酸疫苗质粒为模板,经PCR扩增获得2xesat-6基因,克隆至pET-28a质粒,构建原核表达质粒pET2E6;转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导表达;用Ni2+柱亲和层析纯化重组蛋白,并用Western blot鉴定其反应原性,ELISA检测其敏感性和特异性.结果 ESAT-6重组二聚体以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的35%;纯化的rdESAT-6纯度可达95%,可与ESAT-6小鼠抗血清发生特异性反应;用于结核病血清学诊断的敏感性为30%,特异性为95.8%.结论 已成功表达并纯化了rdESAT-6,可作为结核病血清学诊断或皮试检测用的抗原之一.

关键词：结核分枝杆菌、ESAT-6重组二聚体、表达、纯化、血清学诊断

所属期刊栏目：22

分类号：R378.91+1;Q789(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：上海市卫生局级课题2008057

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：128-131