提高内毒素去除效果的质粒DNA层析纯化工艺的优化

摘要：

目的 优化质粒DNA分子筛或离子交换层析工艺,提高内毒素去除效果.方法 在经精胺沉淀初步纯化的质粒DNA溶液中,加入不同浓度的EDTA(5、10和20 mmol/L)或SDS(0.1%、0.2%和0.5%),分别进行Sephacryl S-1000分子筛层析及Source 30Q离子交换层析,收集质粒峰,测定内毒素含量.结果 用含0.5% SDS的质粒溶液进行分子筛层析,用含10～20 mmol/L EDTA或0.1%～0.5%SDS的质粒溶液进行离子交换层析,质粒DNA的内毒素含量均<5 EU/mg.结论 添加一定浓度的EDTA或SDS可提高质粒DNA分子筛层析或离子交换层析去除内毒素的效果.综合考虑安全性因素,推荐用含10 mmol/L EDTA的质粒溶液进行Source 30Q离子交换层析.

关键词：质粒 DNA、内毒素、层析、EDTA、SDS

所属期刊栏目：22

分类号：R996.1;R392-33(毒物学（毒理学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA219100;美国NIH中国综合性艾滋病研究项目CIPRA

在线出版日期：2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：81-84