丙型肝炎病毒全基因重组质粒的构建及其转染细胞系的建立

摘要：

目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)全基因重组质粒,并建立其转染细胞系.方法 双酶切质粒JFH1,回收HCV DNA,分别与真核表达载体pIRESneo和逆转录病毒载体pLNCX连接,构建重组质粒pIRESneo-HCV和pLNCX-HCV.将重组质粒pIRESneo-HCV转染BHK细胞,pLNCX-HCV转染pA317细胞.通过PCR、间接ELISA和免疫荧光试验鉴定转染细胞.结果 重组质粒PCR和酶切鉴定证明构建正确.转染细胞上清经PCR检测均可见目的 基因条带;ELISA结果表明,转染细胞冻融上清均可与抗HCV小鼠血清发生强的结合反应;转染细胞均可与抗HCV小鼠血清反应,产生荧光,但荧光不多且斑点不亮.结论 已成功构建HCV全基因重组质粒,并建立了可表达HCV蛋白的转染细胞系,为转基因动物模型的建立奠定了基础.

关键词：丙型肝炎病毒、全基因、真核表达、转染细胞系

所属期刊栏目：22

分类号：R373.2+1;Q782(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30570266

在线出版日期：2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：45-48