金黄葡萄球菌CIFA活性基因的克隆及原核表达

摘要：

目的 克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达.方法 以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆人载体pET28a(+)中.构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 PCR扩增出987 bp的目的 基因片段,重组表达质粒经双酶切证明构建正确.表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约36 000处可见目的 条带.目的 蛋白表达量约占菌体总蛋白的36.76%,且具有良好的反应原性.结论 已成功克隆了金黄葡萄球菌ClfA活性基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了目的 蛋白.

关键词：金黄葡萄球菌、表面蛋白凝集因子 A、活性基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：22

分类号：R378.1+1;Q785;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30771596

在线出版日期：2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：38-40