LKB1(Thr336)磷酸化多克隆抗体的制备及其应用

摘要：

目的 制备LKB1(Thr336)磷酸化多克隆抗体.并以其检测细胞中LKB1的表达.方法 用生物信息学方法选取LKB1 Thr336位点附近10个氨基酸,且使Thr336位点磷酸化,并铰链到BSA上.以此为抗原免疫家兔,制备抗血清,纯化后通过ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性,并用LKB1抗体和p-LKB1(Thr336)抗体分别检测正常细胞及肿瘤细胞中LKB1的表达.结果 纯化后的p-LKB1(Thr336)抗体效价为1:1 000;LKB1抗体不仅识别His-LKB1蛋白,而且识别p-LKB1(Thr336)抗原,而p-LKB1(Thr336)抗体仅识别p-LKB1(Thr336)抗原;在正常细胞HL7702和HEK293中,LKB1表达较多,而在HeLa细胞中,LKB1基本没有表达;在这3种细胞中.p-LKB1(Thr336)基本没有表达;在肿瘤细胞S180、COS-7和Caco2中,LKB1和p-LKB1(Thr336)均有表达,p-LKB1表达相对较多.结论 已制备了特异性的p-LKB1(Thr336)多克隆抗体,LKB1-Thr336位点的磷酸化可能是某些肿瘤发生的特征,有望成为肿瘤诊断的指标之一.

关键词：LKB1(Thr336)、磷酸化、多克隆抗体、生物信息学、肿瘤细胞

所属期刊栏目：21

分类号：R392-33

资助基金：安徽省教育厅重点项目2006 KJ087A;安徽省中青年学科带头人培养对象经费

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：995-998,1005