突变型干扰素-τ的表达、纯化及其抗乙型肝炎病毒作用

摘要：

目的 在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ(TFN-τ),并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用.方法 将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸,将合成的基因克隆至pPICZa质粒.构建突变型IFN-τ表达质粒pPICZα-IFN-τ,转化巴斯德毕赤酵母中进行高密度发酵.发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析和分子筛层析纯化后,检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用,并与市售IFN-α2a进行比较.结果 发酵上清液中突变型IFN-τ的表达量为400～500 mg/L,占上清总蛋白的40%以上;纯化收率达31.4%,纯度约为95%;比活为2.1×107 IU/mg;对乙型肝炎病毒的抑制作用与IFN-α2a相当,但细胞毒性显著低于后者.结论 已在毕赤酵母中高效表达了突变型IFN-τ,表达的蛋白具有较高的生物学活性,对乙型肝炎病毒有良好的抑制作用,且细胞毒性较低.

关键词：干扰素-τ、突变型、毕赤酵母、抗病毒作用、乙型肝炎病毒

所属期刊栏目：21

分类号：Q789;Q978.7(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浦东新区科技专项基金项目PKJ2004-76

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：988-991