人源抗菌肽LL-37/hCAP-18真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞MCF-7中的表达

摘要：

目的 构建人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真核表达载体,并在人乳腺癌细胞MCF-7中进行表达.方法 以重组质粒pcDNA4.0-LL-37为模板,采用PCR法扩增LL-37/hCAP-18基因,连入pEGFP-c1质粒,构建真核表达载体pEGFP-c1-LL-37,瞬时转染人乳腺癌细胞MCF-7,采用激光共聚焦显微镜观察重组质粒的转染效率,RT-PCR法检测目的 基因的表达.结果 所构建的抗菌肽LL-37/hCAP-18真核表达载体经双酶切和测序证明构建正确,在瞬时转染MCF-7细胞48 h后,目的 基因转染效率较高,约为40%,RT-PCR结果显示,重组质粒转染的细胞可扩增出339 bp的目的 基凼条带.结论 已成功构建了人源抗菌肽LL-37/hCAP-18的真核表达载体,并在人乳腺癌细胞中获得表达,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础.

关键词：抗菌肽、LL-37/hCAP-18、真核表达、MCF-7细胞

所属期刊栏目：21

分类号：Q782;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技发展计划项目200705357

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：945-947