EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体的构建及其转染COS-7细胞条件的优化

摘要：

目的 构建EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化PEI介导基因转染COS-7细胞的条件.方法 PCR扩增EGFP和PDGFRβ基因,依次连接至pcDNA3.1(+)质粒中,构建融合基因表达载体H-E-P-pcDNA3.1(+),经PEI介导转染COS-7细胞,并对转染条件进行优化.结果 融合基因表达载体经酶切及测序证明构建正确.经PEI介导转染COS-7细胞的最佳条件为:DNA浓度2 μg/ml,N/P比值15.5,在无血清条件下转染.此条件适用于滚瓶培养细胞的转染.结论 已成功构建了EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化了经PEI介导转染COS-7细胞的条件.

关键词：EGFP基因、PDGFRβ基因、融合表达、COS-7细胞、转染

所属期刊栏目：21

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：933-937,944