幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达

摘要：

目的 克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达.方法 以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E. coli BL21(DE3)、Origami(DE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确.3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的 蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的 蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%.Western blot结果表明,表达的目的 蛋白具有良好的反应原性.结论 已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rosssetta(DE3)中获得了高效表达.

关键词：幽门螺杆菌、尿素酶B亚单位、克隆、原核表达

所属期刊栏目：21

分类号：R378;Q785;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2008-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：771-773