10.3969/j.issn.1004-5503.2008.09.006
口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达
目的 构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达.方法 RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定.将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平.结果 经双酶切及PCR鉴定,目的 基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致.荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录.结论 已成功构建了FMDV 2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK一21细胞中获得了表达.
口蹄疫病毒、2B基因、绿色荧光蛋白、融合表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
军事医学科学院科技创新基金;吉林省科技厅科技发展计划项目20050549
2008-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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