抑制新城疫病毒繁殖的九肽及其突变体基因的克隆与原核表达

摘要：

目的 克隆并表达抑制新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽(Nonapeptide)及其突变体基因.方法 设计并合成Nonapeptide 2串联体及其突变体基因,克隆于质粒pUC18,经酶切回收目的 基因,与经相同酶切的表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落,抽提质粒进行鉴定.IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 重组表达质粒经双酶切、PCR及测序鉴定,证明构建正确.阳性重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约29 000处可见一明显条带,与理论值相符.Nonapeptide 2及其突变体蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的41%和37%.Western blot结果显示两种蛋白均具有良好的反应原性.结论 已成功克隆并表达了抗NDV繁殖的Nonapeptide及其突变体基因.

关键词：新城疫病毒、九肽、突变体、克隆、原核表达

所属期刊栏目：21

分类号：S852.65;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划重大项目2006AA10A208-1-4

在线出版日期：2008-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：662-664,668