水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在CHO细胞中的稳定表达

摘要：

目的 在CHO细胞中稳定表达水痘一带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE).方法 PCR扩增VZV gE完整胞外结构域编码基因,克隆至哺乳动物细胞表达质粒PSGHVO中,与DHFR选择性基因和脂质体共转染CHO/dhfr-细胞,筛选稳定分泌人生长激素(hGH)和gE融合蛋白的细胞株.采用ELISA和Western blot方法检测细胞培养上清中hGH和gE融合蛋白的表达,并用Ni2+-NTA柱进行纯化.结果 gE基因PCR扩增产物和重组表达质粒PSGHVO-gE的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见1 500 bp的目的 基因条带.转染PSGHVO-gE质粒和DHFR基因的细胞培养上清液经ELISA和Western blot,确认有重组蛋白表达,gE表达量约为20 mg/L;纯化后蛋白纯度约为90%.结论 已在CHO细胞中稳定表达了VZV gE蛋白,为制备VZV表面抗原奠定了基础.

关键词：水痘-带状疱疹病毒、糖蛋白E、CHO细胞、表达

所属期刊栏目：21

分类号：R511.5;Q786(传染病)

在线出版日期：2008-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：654-657