人巨细胞病毒pp65基因片段的原核表达及鉴定

摘要：

目的 构建人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因片段(363～505位氨基酸)的原核表达质粒,并鉴定所表达蛋白的反应原性.方法 以含有HCMVpp65全长基因的pGEM-T-pp65质粒为模板,PCR扩增pp65基因第1 087～1 515位核苷酸片段,酶切后插入pET-21a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3).经IPTG诱导表达,纯化后进行Western blot鉴定.结果 酶切分析和测序证明原核表达质粒pET-21a(+)-pp65构建正确.表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,以1.0mmol/L IPTG诱导5 h,目的 蛋白的表达量最高.纯化后的蛋白具有良好的反应原性.结论 已成功构建了HCMV pp65基因片段原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白.

关键词：人巨细胞病毒、pp65基因、原核表达

所属期刊栏目：21

分类号：R373;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：山西省科技开发项目033068

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：584-587