牛乳铁蛋白十肽的基因改造、克隆及表达

摘要：

目的 克隆并表达牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因.方法 参照大肠杆菌偏爱密码子,分别针对牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,设计并合成两个具有相同黏性末端的DNA片段,同时在其基因前后分别加上天冬酰胺和甘氨酸的密码子,构成羟胺裂解位点,通过连接获得其二拷贝基因同向串联体.分别将该串联体克隆至载体pUC18上,经双酶切、PCR及测序鉴定后,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物纯化后,用凝血酶切割及羟胺裂解.结果 获得了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2二拷贝基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出相对分子质量约29 000的目的 蛋白条带,纯化后的蛋白经凝血酶切割后,相对分子质量约29 000的目的 蛋白条带消失.结论 已成功克隆并表达了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,为基因工程抗真菌肽的制备奠定了基础.

关键词：牛乳铁蛋白十肽、抗真菌肽、基因改造、基因克隆、表达

所属期刊栏目：21

分类号：Q781;Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：568-571