10.3969/j.issn.1004-5503.2008.07.006
牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体的构建及其在SP2/0细胞中的表达
目的 构建牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中表达.方法 利用PCR技术和重叠延伸剪接(SOE)技术扩增牛分枝杆菌ag85b、mpb64、esat-6基因和mpb64-ag85b融合基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcMAE.将该重组质粒体外转染SP2/0细胞,间接免疫荧光法检测目的 基因的表达.结果 真核表达质粒pcMAE经酶切鉴定及测序,证实构建正确,转染后SP2/0细胞膜上出现均质的蓝绿色荧光.结论 已成功构建了牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中获得表达,为进一步研制牛结核病多基因融合DNA疫苗奠定了基础.
牛分枝杆菌、融合基因、真核表达、sP2/0细胞
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Q782;Q786(基因工程(遗传工程))
2008-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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