幽门螺杆菌HpaA重组蛋白的表达及免疫效果检测

摘要：

目的 表达幽门螺杆菌hpaA基因的重组蛋白,并检测其抗原性和免疫原性.方法 用PCR方法 从H. pylriDNA中扩增hpaA基因片段,插入原核表达载体pQE-30,转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白的相对分子质量和表达形式,Ni2+-NTA树脂纯化后,用Western blot鉴定其反应原性.用重组蛋白免疫家兔,检测其免疫原性.用重组蛋白免疫小鼠.分别检测胃黏膜、PP细胞悬液及小肠黏液中的IgG和sIgA的含量.结果 重组表达质粒pQE30-hpaA构建正确,所得序列完整,插入的基因片段全长783 bp,与基因文库中的hpaA基因同源性达97.3%.表达产物相对分子质量为30 000,目的 蛋白表达量占全菌总量的31.67%,主要存在于碎菌后上清中,纯度在90%以上.Western blot显示该蛋白可与病人血清特异性结合,免疫血清能与重组蛋白反应,双扩散效价为1:16.小鼠体内IgG、IgA、sIgA含量明显高于PBS对照组.结论 已获得高纯度的HpaA重组蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于研制幽门螺杆菌疫苗.

关键词：幽门螺杆菌、HpaA蛋白、表达、免疫效果

所属期刊栏目：21

分类号：Q782;R392-33(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：493-496