10.3969/j.issn.1004-5503.2008.06.009
重组蛹虫草超氧化物岐化酶脱辅基蛋白的表达、纯化及其活性重建
目的 表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用.方法 用不含Cu2+和Zn2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE-FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+Ag+,测定SOD酶活力的变化.结果 蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17 000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜Cu2+浓度为0.005 mmol/L,但其紫外吸收图谱与天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mn2+、Ni2+、Ag2+重建的酶活力远低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力.结论 已成功表达并纯化了蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD,各种金属离子只能有限地重建脱辅基Cu,Zn-SOD的活性.
重组蛹虫草超氧化物岐化酶、脱辅基蛋白、表达、纯化、活性重建
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Q7S4
2008-08-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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