HIV-1 Vif基因的克隆与原核表达

摘要：

目的 克隆HIV-1 Vif基因编码区序列,并在原核细胞中表达.方法 构建原核表达载体pMRI,将Vif基因序列克隆至该载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,菌体裂解后获得特异性表达蛋白,用组氨酸标签特异性亲和树脂分离纯化该蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 表达质粒pMRI-Vif经双酶切,可见约600 bp的Vif基因片段,测序结果 证明质粒构建正确.在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了可溶性Vif蛋白,纯化后经凝胶自动扫捕分析,纯度达85%以上,蛋白浓度约为1 g/L.纯化产物具有良好的抗原特异性.结论 在大肠杆菌中高效表达了可溶性Vif蛋白.

关键词：人类免疫缺陷病毒1型、病毒感染性因子、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：21

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30570363;吉林省杰出青年学者基金20050112

在线出版日期：2008-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：457-459