猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及原核表达

摘要：

目的 构建猪血凝性脑脊髓炎病毒株(67N)血凝素酯酶蛋白(HE蛋白)原核表达系统,为建立特异性免疫学诊断方法提供备选材料.方法 克隆猪血凝性脑脊髓炎病毒(67N)HE蛋白抗原表位富集区基因,构建重组表达质粒pET-HE,并在大肠杆菌中诱导表达.经包涵体的初步纯化,金属螯合层析进一步纯化HE蛋白,SDS-PAGE和Western blot进行检测.结果 大肠杆菌可高效表达HE蛋白,目的 蛋白表达量可占菌体总蛋白的42.2%.纯化后蛋白浓度为0.6 mg/ml,纯度为85.4%.所表达的蛋白可被兔抗猪血凝性脑脊髓炎阳性血清所识别.结论 已成功构建猪血凝性脑脊髓炎病毒HE蛋白原核表达载体,重组HE蛋白抗原具有良好的特异性,可作为检测猪血凝性脑脊髓炎病毒血清抗体的候选抗原.

关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒、血凝素酯酶蛋白、克隆、原核表达

所属期刊栏目：21

分类号：S852.659.6;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30671551;吉林省科技发展重点项目20060206-2

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：273-276,280