促凋亡蛋白BID多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的 制备抗BID的多克隆抗体,用于检测凋亡信号转导过程中BID蛋白的表达.方法 采用PCR技术合成编码BID特异性肽段的基因,构建GST融合基因表达载体,在E.coli BL21中诱导表达GST-BID多肽的融合蛋白,经Glutathione Sepharose)4B纯化后免疫家兔,免疫血清经纯化后,得到抗BID的多克隆抗体,经Western blot鉴定其特异性.结果 通过PCR扩增获得了BID肽段的编码基因;pGEX-6P-1-BID多肽重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确;在E.coliBL21中表达了CST-BID多肽融合蛋白;纯化后蛋白纯度达95%;制备的抗BID多克隆抗体能够特异地识别BID蛋白.结论 所制备的抗BID多克隆抗体可特异性检测BID蛋白.

关键词：促凋亡蛋白、多克隆抗体、特异性

所属期刊栏目：21

分类号：R372-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30640064

在线出版日期：2008-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：227-230