10.3969/j.issn.1004-5503.2008.02.008
汉坦病毒SEO型S基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
目的 构建汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体.方法 应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒SEO型的YZG-Changchun株S基因,克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定及PCR分析后,定向克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析外源蛋白的表达情况.结果 表达载体经双酶切和测序证明构建正确.IPTG浓度为1.0mm ol/L,诱导4.5h时,S基因在原核细胞中得到了高效表达,表达的蛋白占菌体蛋白总量的37%,纯化后的蛋白具有良好的抗原活性.结论 已成功构建了汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体,并得到高效表达.
汉坦病毒、SEO型、S基因、原核表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
2008-05-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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