猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白功能性片段的原核表达及其免疫保护性

摘要：

目的 表达猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)的功能性片段(tmrp),并检测其对小鼠的免疫保护性.方法 将构建的重组克隆载体pMD-tmrp经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将切下的目的基因tmrp亚克隆至原核表达载体pGEX-3X中,转化E.coliBL21(DE3),鉴定正确后,用IPTG诱导,谷胱甘肽亲和层析纯化GST-tmrp,免疫BALB/c小鼠,测定其免疫保护率.结果 阳性工程菌经IPTG诱导,表达了可溶性目的蛋白,相对分子质量约为73 000.0.8 mmol/L IPTG,37℃,pH7.2诱导4 h,表达量最高,为25.36%.经亲和层析纯化,融合蛋白纯度达93.7%.免疫BALB/c小鼠后,免疫保护率可达60%.结论 已成功获得了具有免疫活性的GST-tmrp.

关键词：猪链球菌2型、溶菌酶释放蛋白、原核表达、免疫保护

所属期刊栏目：21

分类号：S858;Q786(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2008-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：23-25