10.3969/j.issn.1004-5503.2007.11.017
汉逊酵母高密度发酵表达乙型肝炎表面抗原的甲醇流加控制策略
目的 考察不同甲醇流加策略对汉逊酵母(Hansenula polymorpha)高密度发酵表达重组乙型肝炎表面抗原的影响.方法 在细胞生长阶段采用DO/pH在线测量的控制方法,使酵母细胞密度达到一个较高水平,诱导期比较DO-Stat/pH-Stat法和离线检测甲醇两种控制流加甲醇的方法,同时也比较用甘油和甲醇双碳源间断流加法与单纯流加甲醇法对目的 蛋白表达的影响.结果 诱导期用DO-Stat和pH-Stat法不能有效地提高乙肝表面抗原表达量,而离线检测甲醇的控制方法,在诱导阶段可将甲醇浓度控制在0~5 g/L的范围,乙肝表面抗原表达量比DO-Stat/pH-Stat法提高了20%.甲醇氧化酶(MOX)酶活性的变化与乙肝表面抗原表达量变化存在对应关系,交替加入甘油和甲醇双碳源刺激,可以使乙肝表面抗原表达量达到395 mg/L.结论 已筛选出优化工艺配置,并建立了切实可行的规模化生产工艺.
汉逊酵母、高密度发酵、表达、乙肝表面抗原、甲醇、流加
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z487
2008-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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