葡萄球菌蛋白A的纯化新工艺

摘要：

目的 建立一种高效、简便、实用的分离纯化葡萄球菌蛋白A(SPA)的工艺.方法 采用超声波破菌和IgC-Sepharose 4B亲和层析分离纯化SPA;以Lowry法检测蛋白含量;双向琼脂免疫扩散法测定效价和特异性;用还原和非还原SDS-PAGE法检测纯度和相对分子质量.结果 此法制得的3批SPA的蛋白含量分别为4.7、4.4和5.4 mg/ml,收率分别为2.70、2.64和3.78g/100 g湿菌.对人IgG的免疫双扩散效价均为1:64;与正常人、豚鼠、家兔和小鼠的血清反应均出现一条沉淀线,而与鸡和羊不出现沉淀线.经非还原SDS-PAGE检测只呈现一条蛋白带,相对分子质量约为160 000～180 000;经还原SDS-PAGE检测呈现两条蛋白带,相对分子质量分别约为67 000和34 000.结论 已成功建立了分离纯化SPA的新工艺.

关键词：葡萄球菌蛋白A、分离、纯化、亲和层析

所属期刊栏目：20

分类号：R392-33

在线出版日期：2007-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：528-530