重组SARS病毒N蛋白的制备及其初步应用

摘要：

目的 在大肠杆菌中表达重组SARS-CoV N蛋白,并进行纯化,为进一步研制SARS早期诊断试剂奠定基础.方法 通过RT-PCR获得SARS-CoV N蛋白基因片段,并克隆至大肠杆菌表达载体pQE30中,构建重组质粒.转化E.coli M15,IPIG诱导表达.经SDS-PAGE和Western blot鉴定,采用Chelating-Sepharose Fast Flow纯化融合蛋白,并免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清抗体水平.结果 所构建的重组表达载体pQE30-N经诱导可表达重组SARS病毒N蛋白.该蛋白纯化后,纯度可达90%左右.Western blot检测表明,重组SARS病毒N蛋白可与SARS患者恢复期血清呈现特异的免疫反应.免疫BALB/c小鼠可获得高效价抗血清.结论 重组SARS-CoV N蛋白具有良好的抗原性,可用于SARS-CoV感染的早期诊断.

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒、N蛋白、诊断试剂、多克隆抗体

所属期刊栏目：20

分类号：R373.1;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国博士后科学基金20040350237

在线出版日期：2007-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：478-481