乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

摘要：

目的 研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性.方法 将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA4-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2 MIC1病毒液.应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验.提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析.结果 SA14-14-2 M1C1病毒液滴度达1.4×107 PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9 LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0 LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡.扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1 340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一.结论 SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性.

关键词：流行性乙型脑炎、SA14-14-2株、三带喙库蚊、生物学特性、分子生物学特性

所属期刊栏目：20

分类号：R373.31(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：419-421