肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达

摘要：

目的 构建肿瘤抑制基因WWOX的真核表达载体,并观察其在人肺腺癌细胞A549中的表达.方法 采用RT-PCR法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序后定向连接到真核表达载体pEGFP-C1中,构建真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并用脂质体转染至A549细胞中,采用共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)与WWOX的融合蛋白在A549细胞中的表达.结果 测序结果显示,RT-PCR法获得的WWOX全编码序列与GenBank中报道的序列一致.真核表达载体pEGFP-C1-WWOX转染A549细胞48 h后,共聚焦显微镜观察到细胞中有绿色荧光呈现,RT-PCR观察到WWOX基因得到有效转录.结论 已成功构建了肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并在A549细胞中表达了WWOX和GFP融合蛋白.

关键词：肿瘤抑制基因、真核表达、A549细胞

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：402-405