进化免疫球蛋白结合分子LD5的原核表达、纯化及结合活性

摘要：

目的 对新型进化免疫球蛋白(Ig)结合分子LD5进行原核表达和纯化,并鉴定其结合活性.方法 将LD5基因片段克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌后,IPTG诱导表达.以8 mol/L尿素裂解菌体后,上清经Ni2+-NTA柱纯化,并对纯化蛋白进行SDS-PAGE及Western blot分析.以ELISA和Dot blot对LD5蛋白结合IgG、IgM活性进行鉴定.结果 LD5分子在大肠杆菌中获得成功表达,表达的融合蛋白相对分子质量为59 000.Western blot表明纯化的LD5蛋白能特异结合IgG.ELISA结果显示,LD5在结合IgM上较SpA具有明显的优势.结论 LD5分子在大肠杆菌中已成功表达,纯化的LD5蛋白保留了天然Ig结合分子的结合活性.

关键词：进化免疫球蛋白结合分子、原核表达、结合活性

所属期刊栏目：20

分类号：R392.11;Q786

资助基金：国家自然科学基金30472050;上海市科技攻关项目05DZ19317

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：322-326