重组HIV-1 CN54 Nef抗原的制备及鉴定

摘要：

目的 原核表达HIV-1 CN54调控蛋白Nef,并进行纯化、复性及鉴定.方法 将CN54 Nef基因克隆至pThioHisA载体,构建非融合表达载体,转化大肠杆菌BL21 Codonplus-RIL,IPTG诱导表达,通过尿素梯度洗涤包涵体纯化Nef蛋白,透析复性.Western blot检测目的蛋白的特异性.结果 Nef蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上.用尿素洗涤法可直接纯化Nef,纯度达到90%以上.Nef蛋白透析后溶解于PBS缓冲液中.Western blot检测显示了良好的特异性.结论 HIV-1 CN54 Nef抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达,采用的纯化和复性Nef蛋白的工艺简便、快捷,为开发针对Nef基因的HIV-1疫苗奠定了基础.

关键词：HIV-1/CN54、Nef蛋白、DNA疫苗、原核表达

所属期刊栏目：20

分类号：R392-33;R512.91

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA219100;美国NIH中国综合性艾滋病研究项目CIPRA;1U19AI51915-02

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：318-321