10.3969/j.issn.1004-5503.2007.05.001
睫状神经营养因子突变体的克隆、表达、纯化及生物学活性
目的 设计具有更高生物学活性的睫状神经营养因子突变体,并对其进行表达、纯化及生物学活性检测.方法 以计算机分子模拟系统设计突变体,重叠延伸PCR方法获得突变体的编码区DNA序列,克隆入表达载体pThioHisA,转化E.coli BL21,以IPTG诱导表达.复性纯化后,用鸡胚背根神经节无血清培养法和小鼠减重法进行生物学活性测定.结果 目的蛋白以包涵体形式存在,表达量在35%以上,纯化后的纯度达95%以上,能有效地促进鸡胚背根神经节的生长,并能使正常小鼠的体重降低,脂肪指数下降.结论 所设计的突变体经表达及纯化后,具有良好的生物学活性,为进一步研究突变体蛋白的促神经生长和减肥作用奠定了基础.
睫状神经营养因子、突变体、克隆、表达、生物学活性
20
Q786(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划2003AA2Z3480
2007-06-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
313-317