毕赤酵母表达乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化和免疫效果

摘要：

目的 研究重组毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化方法及免疫效果.方法 甲醇诱导含preS2S基因的重组毕赤酵母菌,采用蔗糖区带速率离心、Butyl-S-Sepharose 4FF疏水层析和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析等方法,对表达产物进行纯化.纯化后蛋白经SDS-PAGE和Western blot方法鉴定,制备成疫苗,并进行效力试验.放射免疫法检测免疫小鼠血清抗体浓度,计算ED50和相对效力.ELISA法检测血清中的preS2S抗体.结果 纯化后的preS2(epi)S蛋白相对分子质量约为27 000,且能与特异性抗体结合.两批纯化蛋白制备的疫苗ED50分别为0.35和0.48 μg/ml,参比苗为0.52 μg/ml.2批疫苗的体外相对效力分别为1.5和1.1,均合格,血清抗体平均浓度为808和784 mIU/ml,参比苗为312 mIU/ml.2批疫苗免疫小鼠后均产生了preS2抗体.结论 该纯化方法实用有效,纯化后的preS2(epi)S蛋白比S蛋白具有更好的免疫原性.

关键词：乙型肝炎病毒、preS2蛋白、S蛋白、纯化、免疫效果

所属期刊栏目：20

分类号：R373.+21;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：296-299