人HSP70与MAGE-4表位基因原核表达载体的构建及表达

摘要：

目的 构建热休克蛋白70(HSP70)与黑色素瘤抗原4(MAGE-4)抗原表位基因的原核表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法 在热应激条件下,用PCR法从结肠腺癌细胞获取HSP70基因.在线用蛋白质二级结构预测软件分析MAGE-4抗原表位,PCR获取MAGE-4抗原特征表位基因.将二者分别克隆入pGEM-T easy载体,酶切鉴定后,将HSP70基因亚克隆入pET28a原核表达载体,再将MAGE-4基因克隆入HSP70基因的下游,构建重组质粒pET28a-HSP70-MAGE-4.转化大肠杆菌,IPTG诱导表达并鉴定.结果 所构建的HSP70与MAGE-4抗原表位基因表达载体pET28a-HSP70-MAGE-4,经PCR及DNA测序结果表明构建正确.SDS-PAGE及Western blot鉴定均在预期位置出现阳性条带.结论 已成功构建了人HSP70与MAGE-4抗原表位基因的原核表达载体,为疫苗研究提供了依据.

关键词：热休克蛋白、黑色素瘤抗原、原核表达

所属期刊栏目：20

分类号：Q786;R730.1(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：260-263