人鼻病毒3C蛋白酶基因的克隆、表达、纯化及活性

摘要：

目的 获得重组3C蛋白酶,开发一种新型的基因工程工具酶.方法 通过RT-PCR方法获得人鼻病毒3C蛋白酶基因,克隆入表达载体pBV220,构建非融合表达载体pBV220-3C,转化大肠杆菌BL21(Gold)进行表达.表达产物经变性阳离子交换层析纯化后复性,再经Superdex-75凝胶过滤进一步纯化,获得的3C蛋白酶在4℃条件下,酶切融合蛋白IL-11,进行活性测定.结果 3C蛋白酶在大肠杆菌中获得了稳定、高效表达,表达量约占菌体总蛋白的25%,以包涵体形式存在.经过纯化、复性,纯度达90%以上,获得的3C蛋白酶能够有效切割含3C酶切位点的融合蛋白.结论 已成功开发了一种新型的基因工程工具酶.

关键词：人鼻病毒、蛋白酶、工具酶、基因工程

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：240-243