10.3969/j.issn.1004-5503.2007.03.005
抗乙型肝炎病毒表面抗原的IgG全抗体表达载体的构建
目的 构建抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的IgG全抗体杆状病毒表达载体.方法 用PCR方法扩增抗HBsAg 抗体Fab片段的轻链(L)及重链Fd段(VH+CH1)基因片段,将杆状病毒载体pAC-k-Fc与L基因连接,重组为过渡表达载体pAC-k-L-Fc,再与Fd基因连接,构建重组表达载体pAC-HBs-Fc,并进行酶切鉴定及DNA测序分析.确定正确后,转染昆虫细胞sf9,用免疫荧光检测IgG的表达.结果 PCR扩增的片段约650 bp,与预期值一致.载体pAC-k-L-Fc和pAC-HBs-Fc的酶切片段和DNA序列与预期结果一致.转染sf9细胞呈阳性荧光反应,未转染细胞呈阴性荧光反应.结论 已成功构建表达载体pAC-HBs-Fc,为表达抗人HBsAg的IgG全抗体奠定了基础.
乙型肝炎病毒表面抗原、基因工程抗体、杆状病毒
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R5(内科学)
2007-04-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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170-173