重组B7-H1IgV融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

摘要：

目的 以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗.方法 将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达.Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Western blot鉴定.用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性.结果 所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H11gV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清.经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞.结论 rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用.

关键词：B7-H1IgV融合蛋白、肿瘤、免疫治疗

所属期刊栏目：20

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：教育部长江学者和创新团队发展计划IRT0459

在线出版日期：2007-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：9-14