抗狂犬病病毒抗体的制备及酶联免疫法的建立

摘要：

目的 制备具有中和活性的抗狂犬病病毒(Rabies virus,RV)抗体,并建立检测RV抗原的ELISA法.方法 以RV全病毒免疫2只新西兰家兔,制备抗RV多克隆抗体.以RV全病毒免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,建立稳定分泌抗RV单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以小鼠中和试验(MNT)检测抗体的中和活性.以ELISA双抗体夹心法和ELISA竞争法检测RV抗原.结果 2只家兔的多克隆抗体ELISA效价分别为1:6.0×103和1:1.2×104,纯化的兔抗RV IgG中和活性分别为46.3和29.2 IU/ml.获得了9株稳定分泌抗RV的单克隆抗体杂交瘤细胞株,属于IgG1或IgG2b亚型,腹水的抗体ELISA效价为1:1.0×105～1:1.0×107.单克隆抗体3E5、4C2和4F8具有中和活性,Western blot分析提示,单克隆抗体4C2是针对RV糖蛋白线性表位的抗体.以单克隆抗体4C2作为捕捉抗体,兔多克隆抗体作为检测抗体,建立了ELISA双抗体夹心法,检测RV抗原.同时建立了另一种ELISA竞争法,加入固定工作浓度的单克隆抗体4C2,与RV病毒液孵育,以ELISA间接法检测RV病毒抗原.结论 所获得的狂犬病毒多克隆和单克隆抗体具有中和活性,可在ELISA中用于检测RV抗原.

关键词：狂犬病毒、单克隆抗体、多克隆抗体、酶联免疫法

所属期刊栏目：19

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：619-622