10.3969/j.issn.1004-5503.2006.06.006
人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段的基因克隆和原核表达
目的 克隆人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段并构建其原核表达系统.方法 用PCR法从人巨细胞病毒AD169株基因组DNA中扩增gB/AD-1片段并克隆至pGEM-T载体,酶切后,亚克隆至表达载体pET-15b,构建重组表达质粒pET-15b/gB/AD-1,并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达.表达产物经金属螯合层析一步纯化,并用Western blot鉴定.结果 gB/AD-1蛋白表达量达到35%.表达产物经纯化后,纯度大于95%.经Western blot检测,表达产物与CMV阳性人血清发生特异性反应.结论 已成功构建重组表达载体pET-15b/gB/AD-1,并在大肠杆菌中高水平表达gB/AD-1.
人巨细胞病毒、包膜糖蛋白、抗原决定簇
19
R3(基础医学)
2006-12-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
571-573