重组铜绿假单胞菌外毒素A 工程菌发酵及表达产物的纯化

摘要：

目的建立稳定、高效表达重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)的工程菌发酵及表达产物纯化工艺.方法规模化发酵表达rEPA的重组大肠杆菌rPE553D,离心收集菌体,渗透压调解使菌体周质间隙蛋白释放后,高速离心收集蛋白溶液.经DEAE Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SOURCE 30Q强离子交换层析,超滤浓缩纯化rEPA.用HPLC、SDS-PAGE和Western blot等方法检定生化和免疫学特性,并用小鼠和Vero细胞检定毒性.结果每55 L培养基中rEPA产量超过4 g,纯度在95%以上,细胞毒性降低了至少32 000倍.其余各项指标均符合<中国生物制品规程>要求.结论已建立了收率高、纯度好、稳定、适合规模化生产rEPA的工艺.

关键词：铜绿假单胞菌、外毒素A、工程菌

所属期刊栏目：19

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：407-410