人乳头瘤病毒16型晚期蛋白真核表达质粒的构建

摘要：

目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础.方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16 L1基因,与pMD18-T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1-L1),瞬时转染Cos-7细胞,利用免疫组化技术检测表达产物.通过小鼠淋巴细胞转化试验检测免疫原性.结果所得L1基因的序列与GenBank中序列比较存在若干变异,并由此引起相应的氨基酸发生变化.pVAX1-L1瞬时转染Cos-7细胞,经免疫组化技术检测到棕黄色免疫复合物的形成,说明有表达产物L1蛋白产生.淋巴细胞转化试验结果显示,试验组与对照组差异有显著意义.结论宫颈癌病理组织中HPV16 L1基因序列存在一定程度的变异,所得L1基因表达产物具有生物学活性.

关键词：人乳头瘤病毒、晚期蛋白、真核表达质粒、Cos-7细胞

所属期刊栏目：19

分类号：TQ464

在线出版日期：2006-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：259-261