人MC1R基因在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中的表达

摘要：

目的利用杆状病毒表达系统进行人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R基因在Sf9昆虫细胞中的表达.方法以pMD18-T-MC1R为模板,利用PCR方法扩增人MC1R基因,将MC1R基因连接到pfastBac1质粒上,与穿梭载体DH10Bac转座,获得Bacmid-MC1R质粒后,通过脂质体介导,转染Sf9细胞,使其表达重组杆状病毒,经SDS-PAGE检测表达产物,放射受体分析法检测目的蛋白MC1R活性.结果Bacmid-MC1R质粒转染Sf9细胞后的SDS-PAGE图谱,在相对分子质量为35 000处有一条新生蛋白带.放射受体分析结果显示表达的蛋白与标记配体特异亲和,具有生物学活性.结论MC1R基因成功在真核细胞中得到表达.

关键词：MC1R基因、克隆、表达、杆状病毒、昆虫细胞

所属期刊栏目：18

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：386-389